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              Pull Down Assay

              服务简介

              GST-pull-down

              利用GST融合蛋白沉降技术将靶蛋白与GST标签蛋白进行融合表达纯化获取融合表达蛋白。靶蛋白-GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上作为与目的反比亲和的支撑物充当诱饵蛋白目的蛋白溶液过柱纯化即可捕获与之相互作用的俘获蛋白洗脱结合物通过SDS-page电泳分析或联用WB和MS检测可验证蛋白间的相互作用或筛选获取相应的目的蛋白。

              RNA/DNA pull-down

              Pull down是检测RNA/DNA结合蛋白与其靶RNA/DNA之间相互作用的主要实验手段之一。用生物素标记RNA/DNA 探针与胞浆蛋白提取液孵育形成RNA/DNA—蛋白质复合物。该复合物可与链亲和素标记的磁珠结合从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后通过Western Blot实验检测特定的RNA/DNA结合蛋白是否与RNA/DNA相互作用还可以对该蛋白进行质谱(MS)鉴定蛋白质类型。

              主要流程

              GST-pull-down

              构建GST-靶蛋白融合表达载体 WB检测融合蛋白的表达 获取总蛋白裂解液 GST-pull-down调取互作结合蛋白 对结合蛋白进行纯化与分析

              RNA/DNA pull-down

              RNA/DNA生物素探针制备 细胞裂解液制备 .获取总蛋白裂解液 pull-down调取互作结合蛋白 对结合蛋白进行纯化与分析

              订购信息

              服务项目

              说明

              周期

              报价

              GST-pull down

              通过磁珠结合捕获形成复合体形式更加灵敏和针对性获取结合蛋白:磁珠与GST抗体孵育结合通过与样品裂解液孵育形成磁珠-GST抗体-GST融合蛋白-互作结合蛋白综合体进而纯化获取目的结合蛋白.

              4~6周

              详细

              RNA pull down

              需要相关文献及客户的要求根据基因序列进行DNA序列T克隆做外转录成RNA再进行生物素标记与细胞裂解液结合分离结合蛋白。

              5~7周

              DNA pull down

              可以直接合成生物素标记DNA探针与细胞裂解液结合磁珠法筛选分离离结合蛋白。

              4~6周

              GST-pull-down

              客户提供

              提供样品
              1) 已验证含有融合蛋白表达的样品(验证表达融合蛋白的WB结果图)
              2) 可用于WB检测和IP实验的GST标签抗体

              最终交付

              交付结果
              1) 原始数据、结果图片
              2) 标准实验报告(含实验步骤、流程及试剂耗材厂家)
               

              RNA/DNA pull-down

              客户提供

              提供样品
              1) 需检测的细胞样品
              提供信息
              1) 目的基因信息;
              2) 目的蛋白信息;
              3) 一抗及其说明书

              最终交付

              交付结果
              1) 原始数据、结果图片
              2) 标准实验报告(含实验步骤、流程及试剂耗材厂家)